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色谱柱分离度的影响因素有哪些?分离度下降应如何处理?

发表时间:2021-05-28  |  点击率:867
色谱柱是一种装填有固定相用以分离混合组分的柱管。它的分离度取决于所选择的固定相,以及色谱柱的制备和操作条件等因素。
 
影响气相色谱分离度的因素有:
 
1、色谱长度
 
色谱长度与分离度通常成正比。色谱柱越长,组分之间分辩效果越好,但色谱柱越长压降越大,而输入的压力是有限的。色谱柱过长会增大进出口压力比,相反会降低分离度。通常采用的柱长2m~4m,内径2mm,毛细管柱长度可达20m~150m,内径为0.2mm。
 
2、色谱柱填料颗粒大小
 
填料的粒子越细,由于表面积增加,分辩效果越好,分离度就越高。但是颗粒极细时可能会增大柱压降,也会起反作用。一般采用惰性、多孔的固体颗粒。多由硅藻土或玻璃珠制成,分析不同极性的微生物化合物,为了获得最适的分离条件,要求有不同固定相的载体。
 
3、柱温
 
气体在液体中的溶解度或在固体表面的吸附程度都随温度增高而降低,在气液色谱分析中,当超过一定温度时,静态的液体通常会从色谱柱中挥发掉,所以选择柱温时应考虑到样品的沸点。一般是略低于样品沸点的平均值。
 
4、载气种类
 
常用的载气有 氮气、氢气等。其中氢气、氦气的分子量较小,有利于提高分析速度,但浓度较高的介质易在其间形成扩散,影响分离度,所以在实际测量中氢气、氦气一般都用在介质浓度较低的区域并提高其流速,减少扩散的影响。
 
在测定分析时发现分离度下降,应如何处理:
 
(1)载气流速设置不合理,可以通过降低载气流速  来提高分离度;
(2)柱温设置不当,降低柱温,或改用程序升温;
(3)色谱柱受污染,应清洗柱子;
(4)减少进样量,提高进样技术;
(5)提高气化室温度;
(6)减少系统的死体积,主要是色谱柱要连接到位,毛细管色谱柱要分流,选择合适的分流比。
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