岛津液相色谱柱是一款新开发的高纯硅胶液相色谱柱。具有高分离度、高惰性、高柱效、耐污染等特点,该系列色谱柱可在较宽pH范围、较高比例水相流动相条件下稳定使用。广泛适用于食品、药品、环境等多个领域的分析检测项目。其通过优化的表面键合密度,在保证良好分离效果的前提下,可提供适中的疏水作用力,化合物洗脱更快,分析效率更高。在与岛津高分离度系列VP-ODS和GIS C18的对比实验中可以看到,使用SHIMSEN Ankylo C18色谱柱可获得相当的分离效果,同时出峰更迅速。柱效更高,峰形也更尖锐。
岛津液相色谱柱的操作流程:
一、前期准备与核对
操作前需核对色谱柱型号、规格、最大耐压、耐受温度、适配流动相体系,确认与检测方法一致。检查柱身完好无裂纹、两端堵头密封完整,同时确认仪器管路无气泡、泵体与接头无渗漏。提前过滤流动相与样品,水系、有机相流动相均需经0.45μm或0.22μm滤膜过滤并超声脱气,样品必须过滤后上机,避免杂质堵塞柱筛板、损伤固定相。
二、色谱柱安装规范
严格按照柱身标注的FLOW流向箭头安装,严禁反向使用,防止固定相脱落、柱效下降。安装时保持接头平整,手紧拧牢后轻微扳手加固,避免过紧压坏密封垫或过松漏液。安装完成后确认色谱柱适配流速与压力上限,常规4.6mm内径色谱柱初始流速控制在0.2–0.5mL/min,禁止高流速、高压瞬间冲击色谱柱。
三、新柱活化与平衡(核心步骤)
出厂保存溶剂多为甲醇或乙腈,需充分活化舒展碳链。先以低流速0.2mL/min开机,逐步升至常规分析流速,用纯甲醇或纯乙腈冲洗20倍柱体积,彻d润湿固定相、去除柱内保护溶剂。若后续使用含水流动相,需梯度过渡,禁止纯有机相直接切换高比例水相,避免固定相塌陷、柱压骤升。
更换检测方法或流动相体系时,需提前用过渡溶剂冲洗柱内残留溶剂,再用目标流动相平衡色谱柱,直至基线平稳、压力稳定、保留时间恒定,方可进样分析。含缓冲盐的流动相平衡时间需适当延长,确保柱内体系完q稳定。
四、样品分析过程操作
分析期间严格控制柱温、流速、压力在色谱柱耐受范围内,常规色谱柱柱温不超过40℃,避免高温加速固定相老化。严禁强酸、强碱、高浓度盐溶液长期过柱,缓冲盐流动相不可长时间滞留柱内。定期观察柱压与峰形,若出现压力异常升高、峰拖尾、保留时间漂移,需立即停止进样排查问题。分析过程禁止随意更改流速、柱温、流动相比例,保证检测数据稳定可靠。
五、分析后清洗操作
含缓冲盐、离子对试剂的体系,必须先用水相冲洗除盐,以10%甲醇水溶液冲洗5–10倍柱体积,彻d洗脱柱内残留盐分,防止盐结晶堵塞筛板、腐蚀固定相;再切换纯甲醇或纯乙腈冲洗10–20倍柱体积,去除残留样品与极性杂质。
纯有机、无盐体系检测结束后,直接用纯乙腈或甲醇冲洗稳定即可。清洗全程梯度降流速,禁止直接停泵,避免压力骤变产生柱内气泡、损伤填料。
六、色谱柱再生与维护
若出现柱压升高、柱效下降、峰形异常,需针对性再生。反相C18柱可依次用水、甲醇、异丙醇冲洗,去除强保留杂质;重度污染可低浓度酸碱体系温和冲洗后,再纯水、有机相复原。正相柱、氨基柱、氰基柱需严格参照原厂方法再生,禁止通用反相清洗体系,避免不可逆损伤。
七、拆卸与长期保存
清洗完成、系统压力平稳后,缓慢降低流速至0,拆卸色谱柱,立即用原装堵头密封两端,防止柱内溶剂挥发、填料干裂。常规反相柱长期保存封存纯甲醇或乙腈;特殊极性柱、亲水柱按原厂要求保存,禁止留存水相、缓冲盐溶液。同时做好使用登记,记录使用时间、流动相体系、样品类型,便于后续维护追溯。
八、核心禁忌注意事项
禁止超压、超温、反向使用色谱柱;禁止未过滤样品、浑浊液体直接上机;禁止缓冲盐长期滞留柱内;禁止高低浓度溶剂直接切换,避免相析冲击填料;避免色谱柱剧烈震动、磕碰,保护柱床结构完整。