ACE色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成。柱管多用不锈钢制成,压力不高于70kg/cm2时,也可采用厚壁玻璃或石英管,管内壁要求有很高的光洁度。为提高柱效,减小管壁效应,不锈钢柱内壁多经过抛光。也有人在不锈钢柱内壁涂敷氟塑料以提高内壁的光洁度,其效果与抛光相同。还有使用熔融硅或玻璃衬里的,用于细管柱。色谱柱两端的柱接头内装有筛板,是烧结不锈钢或钛合金,孔径0.2~20µm(5~10µm),取决于填料粒度,目的是防止填料漏出。
1、避免色谱柱反吹
通常,色谱柱不能反吹。只有当色谱柱操作说明书上注明色谱柱可以反吹时,才能进行反吹,以除去残留在色谱柱头上的杂质。否则,反吹色谱柱的作用是迅速降低色谱柱的效率。
2、避免流动相使用不当,损坏固定相
选择合适的流动相(尤其是pH值)以避免损坏固定相。有时可以在进样器前面连接一个前置柱。分析柱为键合硅胶时,前置柱为硅胶。因此,在进入分析柱之前,可以用硅胶将流动相“饱和”,以防止分析柱中的硅胶基质溶解。
3、禁止未经样品处理直接进入色谱柱。
避免将含有复杂基质的样品(尤其是生物样品)直接注入色谱柱。有必要对样品进行预处理或将进样器连接到色谱柱。保护柱。保护柱通常是填充有类似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。
4、不要将缓冲溶液长期存放在色谱柱中。
存放色谱柱时,用乙腈或甲醇填充色谱柱,并拧紧色谱柱接头以防止溶剂蒸发和干燥。不要将缓冲溶液留在柱子中过夜或更长时间。