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带你了解尺寸排阻色谱柱的相关知识点

发表时间:2022-08-28  |  点击率:133
尺寸排阻色谱柱由亲水性球形聚甲基丙烯酸酯颗粒填充,主要针对小分子蛋白、蛋白片段、多肽、寡核苷酸的分离分析。
 
特点:
 
1.保留时间是分子尺寸的函数,有可能提供分子结构的某些信息。2.保留时间短,谱峰窄,易检测,可采用灵敏度较低的检测器。
3.固定相与分子间作用力极弱,趋于零。由于,柱子不能很强保留分子因此柱寿命长。
4.不能分辨分子大小相近的化合物,相对分子质量差别必须大于10%能得以分离。
5.大分子的流程短,移动速度快,先流出色谱柱;小分子的流程长,移动速度慢,后流出色柱;而中等分子居两者之间。
6.生物相容性好,有很高的活性回收率。
 
流动相的选择:
 
排阻色谱所选用的流动相必须能溶解样品,并必须与凝胶本身非常相似,这样才能润湿凝胶。当采用软性凝胶时,溶剂也必须能溶胀凝胶。溶剂的粘度要小,因为高粘度溶剂往往限制分子扩散作用而影响分离效果。
 
尺寸排阻色谱柱的保存:
 
日常使用中,建议保存在150mM磷酸盐缓冲液中(pH7.0)。如长期不用时,可将色谱柱保存至20%乙醇中,以防止菌体污染。(注:可根据具体使用条件选择保存方式,如实验条件为缓
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