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简述Wondasil色谱柱保存方法和峰形异常原因

发表时间:2022-01-10  |  点击率:156
  对于色谱柱的知识科普,你可以来参观一下,让你之后更好的使用它。
  Wondasil色谱柱内径知识说明:柱效率与柱半径平方成反比,内径越小柱效越高,但内径越大,柱容量也增加,允许进样量就越多。当进样量超过柱容量时,则因柱内每块理论板内不能建立真正的平衡,将会导致色谱蜂畸变,柱分辨率降低,重现性不好。因此对于复杂样品需要精确分离,必须使用小内径柱子。另一方面若样品中存在具有很不相同浓度组份化合物,为了增加样品容量就必须使用内径大的柱子,目前实验室使用常见的柱子内径一般是4.6mm。

  Wondasil色谱柱保存方法和峰形异常原因:
  保存:短期保存(隔夜或隔周末)用所用的流动相(不含缓冲盐)保存为佳,以尽量减少下次使用的平衡时间。一般只建议在长期保存反相柱的时候用纯醇或乙腈,使用80%左右有机相保存也属好的选择,且足以避免长菌。强烈建议在柱身上贴标签标明保存溶剂。离子交换柱和水性凝胶柱等适合保存在水溶液中的色谱柱,可加0.05%化钠溶液防止K菌。正相柱无论是短期还足长期,都推荐保存住所用流动相巾。
  要长时间保存,必须存于合适的溶剂下。对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中,正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中,离子交换柱可以储存于水(含防腐剂化钠或柳硫汞)中,并将购买新岛津液相色谱柱时附送的堵头堵上。特殊类型色谱柱的储存,需参考色谱柱说明书,使用岛津液相色谱柱厂商推荐的溶剂。
  峰形异常:峰形对称性的优劣对峰面积和分离度有很大的影响,从而影响分析结果的准确性。先检查样品足否过载,由于样品过载引起的峰形后拖不能通过改变色谱条件消除。如果发现过载,需降低进样量(包括进样体积或浓度),进样量越小,峰形越好,例子如头孢尼西钠的测定。其次,硅醇基次级保留引起部分峰拖尾。这种情况发生,选择高密键合和彻底的双蜂尾工艺的色谱柱能改善峰形。另外,溶解样品的溶剂洗脱能力比流动相强会发生峰前延,所以样品选用流动相溶解。
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