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Shim-Pack色谱柱清洗的溶剂选择

发表时间:2021-08-25  |  点击率:76
  Shim-Pack色谱柱清洗的溶剂选择:
  阳离子交换柱可用稀酸缓冲液冲洗,阴离子交换柱可用稀碱缓冲液冲洗,除去交换性能强的盐,然后用水、甲醇、二氯甲烷(除去吸附在固定相表面的有机物)、甲醇、水依次冲洗。保存色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇,柱接头要拧紧,防止溶剂挥发干燥。禁止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时间。

  色谱柱使用过程中,如果压力升高,一种可能是烧结滤片被堵塞,这时应更换滤片或将其取出进行清洗;另一种可能是大分子进入柱内,使柱头被污染;如果柱效降低或色谱峰变形,则可能柱头出现塌陷,死体积增大。在后两种情况发生时,小心拧开柱接头,用洁净小钢将柱头填料取出1~2mm高度(注意把被污染填料取净)再把柱内填料整平。然后用适当溶剂湿润的固定相(与柱内相同)填满色谱柱,压平,再拧紧柱接头。这样处理后柱效能得到改善,但是很难恢复到新柱的水平。

  在选择Shim-Pack色谱柱之前,需要先了解样品和杂质的类型结构、极性、酸碱性、分子量大小等等。
  1.样品是极性的且弱酸性的;就可以选择C18在酸性水溶液条件下检测,即要选择承受100%纯水且对极性化合物保留很好的色谱柱
  2. 如果样品极性太强,或酸性太强;可以选择CN,NH2,或硅胶柱,亲水色谱,也有使用C18+强阴离子对试剂或强阴离子交换色谱柱(缺点是离子对试剂平衡时间长,对流动相pH要求比较精密,否 则很难重复实验,另外离子对试剂很难洗下来,基本上用了离子对的色谱柱就不能再用于其它实验)
  3. 若样品是碱性的;可选择高纯硅胶柱或一些经过修饰的C18柱,他们都会减少碱性化合物的拖尾,一般会选择中性或偏碱的条件下做,因为这样可增加碱性样品的保留
  4.如果碱性化合物的极性太强,或碱性太强;可以选择宽pH的C18色谱柱在高pH值检测或者选用HILIC色谱柱选择强离子交换柱,也有使用强阴离子对试剂或强阴离子交换色谱柱。
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