液相色谱柱使用的注意事项

使用液相色谱柱做HPLC分析时，通常会遇到一些问题，下面为大家介绍几点液相色谱柱使用的注意事项：

 

1、避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动

温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况；柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料，因此，在调节流速时应该缓慢进行，在阀进样时阀的转动不能过缓。

 

2、应逐渐改变溶剂的组成

特别是反相色谱中，不应直接从有机溶剂改变为全部是水，反之亦然。

 

3、一般说来色谱柱不能反冲

只有生产者指明该柱可以反冲时，才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。

 

4、选择使用适宜的流动相(尤其是pH)，以避免固定相被破坏。

有时可以在进样器前面连接一预柱，分析柱是键合硅胶时，预柱为硅胶，可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”，避免分析柱中的硅胶基质被溶解。

 

5、经常用强溶剂冲洗色谱柱，清除保留在柱内的杂质。

在进行清洗时，对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡，每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右。