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液相色谱柱使用的注意事项

发表时间:2021-07-19  |  点击率:133
使用液相色谱柱做HPLC分析时,通常会遇到一些问题,下面为大家介绍几点液相色谱柱使用的注意事项:
 
1、避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动
温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此,在调节流速时应该缓慢进行,在阀进样时阀的转动不能过缓。
 
2、应逐渐改变溶剂的组成
特别是反相色谱中,不应直接从有机溶剂改变为全部是水,反之亦然。
 
3、一般说来色谱柱不能反冲
只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。
 
4、选择使用适宜的流动相(尤其是pH),以避免固定相被破坏。
有时可以在进样器前面连接一预柱,分析柱是键合硅胶时,预柱为硅胶,可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”,避免分析柱中的硅胶基质被溶解。
 
5、经常用强溶剂冲洗色谱柱,清除保留在柱内的杂质。
在进行清洗时,对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡,每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右。
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