液相色谱柱的四个物理性质参数说明

色谱是一种分离分析手段，分离是核心，因此负担分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。

 

下面对液相色谱柱的四个物理性质参数进行说明。

 

1、柱长，内径

 

如250*4.6mm。一般柱长在2—250mm，柱越长，分离度越高，但柱压更高，分离所需时间更长;但分离度与理论塔板数的平方根成正比，所以一昧增加柱长并不是*的分离手段，一般情况下，150mm、5um的填料可以提供足够的塔板数。

 

2、粒径

 

粒径影响色谱分离度。粒径越小，分离越快，柱效越高，但柱压力越高，柱容易被污染，导致柱寿命降低。常见分析柱通常使用5um填料，复杂的多组分样品分离一般使用3.5um粒径，更大内径的制备色谱柱通常使用更大的粒径。如果固定相选择是正确，但是分离度不够，那么选用更小的粒度的填料是很有用的。3.5um填料填充柱的柱效比相同条件下的5um填料的柱效提高近30%;然而，3.5um的色谱柱的背压却是5um的2倍，因此如何选择填料粒径需要根据现实情况而定。

 

3、孔径　

 

孔径，60A，120A，300A等。孔径小，则含孔率高，比表面积大，载碳量高;色谱柱填料孔径大小需和分子大小相匹配，保证分子自由进出填料孔并与孔内表面的键合相进行分离分配，通常要求孔径直径是分子直径的3倍以上，一般小分子使用80—120A，大分子使用300A。

 

4、颗粒形状

 

颗粒形状，一般有球形和不规则形，当使用黏度较大的流动相时，球形颗粒可以降低柱压，延长色谱柱寿命。

 

5、比表面积

 

比表面积，指的是每克填料的表面积，如180m2/g—350m2/g，与粒度和含孔率有关;比表面积大，会增加样品与键合相之间的反应，增加保留和分离度;比表面积小则可以缩短分析时间和平衡时间，并不是比表面积大或者小就更好，需要选择合适的比表面积。